Apo RNAclean

A-1 Lysis sẹẹli tabi isokan ko to

---- Din lilo iṣapẹẹrẹ, pọ si iye ifipamọ lysis, alekun isọdọkan ati akoko lysis.

A-2 Iye ayẹwo jẹ tobi pupọ

---- Din iye ayẹwo ti a lo tabi pọ si iye ifipamọ lysis.

A-1 Lysis sẹẹli ti ko pe tabi isokan

---- Din lilo iṣapẹẹrẹ, pọ si iye ifipamọ lysis, alekun isọdọkan ati akoko lysis.

A-2 Iye ayẹwo jẹ tobi pupọ

---- Jọwọ tọka si agbara ṣiṣe ti o pọju.

A-3 RNA kii ṣe eluted patapata lati ọwọn

---- Lẹhin fifi omi RNase-ọfẹ kun, fi silẹ fun awọn iṣẹju diẹ ṣaaju fifisẹ.

A-4 Ethanol ninu giga

---- Lẹhin rinsing, centrifuge lẹẹkansi ki o yọ ifipamọ fifọ bi o ti ṣee ṣe.

A-5 Alabọde aṣa sẹẹli ko yọ kuro patapata

---- Nigbati o ba n gba awọn sẹẹli, jọwọ rii daju lati yọ alabọde aṣa kuro bi o ti ṣee ṣe.

A-6 Awọn sẹẹli ti a fipamọ sinu RNAstore ko ni fifẹ daradara

---- iwuwo RNAstore tobi ju alabọde aṣa sẹẹli apapọ; nitorinaa agbara centrifugal yẹ ki o pọ si. A daba pe centrifuge ni 3000x g.

A-7 akoonu RNA Kekere ati opo ni ayẹwo

---- Lo ayẹwo rere lati pinnu boya ikore-kekere jẹ nipasẹ ayẹwo.

A-1 Ohun elo naa kii ṣe alabapade

---- Awọn àsopọ tuntun yẹ ki o wa ni ipamọ ninu nitrogen omi lẹsẹkẹsẹ tabi lẹsẹkẹsẹ fi sinu reagent RNAstore lati rii daju ipa isediwon.

A-2 Iye ayẹwo jẹ tobi pupọ

---- Din iye ayẹwo.

A-3 RNase contamination

---- Botilẹjẹpe ifipamọ ti a pese ninu ohun elo ko ni RNase, o rọrun lati ṣe ibajẹ RNase lakoko ilana isediwon ati pe o yẹ ki o ṣe itọju pẹlu itọju.

A-4 Electrophoresis idoti

---- Rọpo ifipamọ electrophoresis ki o rii daju pe awọn ohun elo ati Ohun elo fifuye jẹ ọfẹ ti kontaminesonu RNase.

A-5 Ikojọpọ pupọ fun electrophoresis

---- Din iye ikojọpọ ayẹwo, ikojọpọ kanga kọọkan ko yẹ ki o kọja 2 μg.

A-1 Iye ayẹwo jẹ tobi pupọ

---- Din iye ayẹwo.

A-2 Diẹ ninu awọn ayẹwo ni akoonu DNA giga ati pe a le ṣe itọju pẹlu DNase.

---- Ṣe itọju DNase ọfẹ-RNase si ojutu RNA ti o gba, ati pe RNA le ṣee lo taara fun awọn adanwo atẹle lẹhin itọju, tabi le sọ di mimọ siwaju nipasẹ awọn ohun elo iwẹ RNA.

Fun awọn ohun elo gilasi, yan ni 150 ° C fun wakati mẹrin. Fun awọn apoti ṣiṣu, ti a rì sinu 0.5 M NaOH fun iṣẹju mẹwa 10, lẹhinna fi omi ṣan daradara pẹlu omi ti ko ni RNase ati lẹhinna sterilize lati yọ RNase kuro patapata. Awọn reagents tabi awọn solusan ti a lo ninu adanwo, ni pataki omi, gbọdọ jẹ ofe ti RNase. Lo omi ti ko ni RNase fun gbogbo awọn igbaradi reagent (ṣafikun omi si igo gilasi ti o mọ, ṣafikun DEPC si ifọkansi ikẹhin ti 0.1% (V/V), gbọn oru ati autoclave).